8x8ⅹ华人永久免费视颍 无菌室-无菌实验室都有哪些要求？

无菌室在微生物实验室中比较常见，无菌室包含准备区、缓冲区、无菌室，建造标准需要符合中华人民共和国卫生行业标准:WS233-2002《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》。二级（P2）无菌室为万级、局部百级，包含高、中、初效过滤系统，无菌室的大小，应按每个操作人员占用面积不少于3m²设置，符合目前世界通用的美国联邦209E标准。更衣间及风淋室采用人体自动感应系统。

双佳净化做为专业的实验室装修建造商，为您介绍无菌实验室的基本要求：

(1)在分隔内间和外间的墙壁或者“隔扇”上，应开一个小窗，用作接种过程中必要的内外传递物品的通道，以便减少人员进出内间的次数，降低污染程度。小窗宽60cm、高40cm、厚30cm，内外都应挂对拉的窗扇。

(2)无菌实验室容积小而严密，使用一段时间后，室内温度很高，故应设置通气窗。通气窗应该设在内室进门处的顶棚上(即距离工作台最远的位置)，最好为双 层结构，外层为百叶窗，内层可用抽板式的窗扇。通气窗可以在内室使用后、灭菌前开启，以流通空气。有条件的可以安装恒温恒湿机。

(3)无菌实验室应有内、外两间，内间是无菌室，外间是缓冲室。房间的容积不宜过大，以便于空气灭菌。最小内间面积2×2.5=5㎡，外间面积1×2=2㎡，高以2.5m以下为宜，都应有天花板。

(4)内间应当设拉门，以便减少空气的波动，门应该设在离工作台最远的位置上;外间的门最好也采用拉门，要设在距离内间最远的位置上

无菌检测实验室建造-实验室装修净化设

双佳净化作为专业的实验室建造装修工程商，为您介绍无菌实验室的管理要求：

2. 工作人员进入无菌室前，必须用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在缓冲间更换专用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用70%的乙醇再次擦拭双手)，方可进入无菌室进行操作。

3. 无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟以上，并且同时打开超净台进行吹风。操作人员进入无菌室应关掉紫外灯；

4. 人员进入无菌室要穿无菌衣、帽、口罩和专用鞋，非工作人员不得随意进入；

5. 无菌室应备有工作浓度的消毒液，如5％的甲酚溶液，70％的酒精，0.1％的新洁尔灭溶液等。 

6. 无菌室内配备紫外灯进行空气消毒，应定期用适宜的消毒液（70%酒精或0.2%新洁尔灭）灭菌清洁，以保证无菌室的洁净度符合要求。

7. 无菌室应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染。每日进行湿式小扫除，每周进行大扫除，每月进行空气和实验台表面的细菌学检测，各项指标控制在最低标准，符合无菌室的技术要求。 

8. 严防一切灭菌器材和培养基污染，已污染者应停止使用。

9. 需要带入无菌室使用的仪器、器械、平皿等一切物品，均应包扎严密，并应用适宜的方法灭菌。 

10. 供试品在检查前，应保持外包装完整，不得开启，以防污染。检查前，用70％的酒精棉消毒外表面。 

11. 无菌间内应保持清洁。操作完毕，应及时清理无菌室，用2%-3%煤酚皂溶液消毒，擦拭工作台面，不得存放与实验无关的物品。再用紫外灯辐照灭菌。需30W紫外灯，距离在 1.0m处，照射时间不少于30min，使用紫外灯，应注意不得直接在紫外线下操作，以免引起损伤，灯管每隔两周需用酒精棉球轻轻擦拭，除去上面灰尘和油垢，以减少紫外线穿透的影响。 

12. 处理和接种食品标本时，进入无菌间操作，不得随意出入，如需要传递物品，可通过小窗传递。

13. 无菌室应每月检查菌落数。在超净工作台开启的状态下，取内径90mm的无菌培养皿若干，无菌操作分别注入融化并冷却至约45℃的营养琼脂培养基约15ml，放至凝固后，倒置于30～36℃培养箱培养48小时，证明无菌后，取平板3～5个，分别放置工作位置的左中右等处，开盖暴露30分钟后，倒置于30～36℃培养箱培养48小时，取出检查。100级洁净区平板杂菌数平均不得超过1个菌落，10000级洁净室平均不得超过3个菌落。如超过限度，应对无菌室进行彻底消毒，直至重复检查合乎要求为止。 

无菌操作基本技术及要求

1. 实验进行前，无菌室及无菌操作台(laminarflow)以紫外灯照射30-60分钟灭菌，以70%的酒精擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10分钟后，才开始实验操作。

2. 每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70%的酒精擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后，再进行下一个细胞株之操作。 

3. .无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置，其它实验用品用完即应移出，以利于气流之流通。实验用品以70%的酒精擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在抬面之中央无菌区域，勿在边缘的非无菌区域操作。 

4. 小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。 

5. 工作人员应注意自身之安全，须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作，并选择适当等级之无菌操作台(至少ClassII)。操作过程中，应避免引起气溶胶类物质的产生，小心毒性药品，例如DMSO及TPA等，并避免尖锐针头之伤害等。 

6. 使用无菌瓶内的溶液时，不可将无菌敷料堵塞瓶口倾倒无菌溶液，或直接伸入溶液瓶内蘸取，以免污染剩余的溶液。 

7. 无菌包内物品不慎污染或无菌包浸湿，外界微生物可渗入包内，造成污染，需重新消毒。

8. 戴手套时应注意未戴手套的手不可触及手套外面，而戴手套的手则不可触及未戴手套的手或另一手套的里面。戴手套后如发现破裂，应立即更换。脱手套时，须将手套口翻转胶下，不可用力强拉手套边缘或手指部分，以免损坏。

9. 每次操作过程中，均应做阴性对照，以检查无菌操作的可靠性。

10. 吸取菌液时，必须用吸耳球吸取，切勿直接用口接触吸管。

11. 接种针每次使用前后，必须通过火焰灼烧灭菌，待冷却后，方可接种培养物。

12. 带有菌液的吸管，试管，培养皿等器皿应浸泡在盛有5%来苏尔溶液的消毒桶内消毒，24小时后取出冲洗。 

13. 如有菌液洒在桌上或地上，应立即用5%石碳酸溶液或3％的来苏尔倾覆在被污染处至少30分钟，再做处理。工作衣帽等受到菌液污染时，应立即脱去，高压蒸汽灭菌后洗涤。

14. 凡带有活菌的物品，必须经消毒后，才能在水龙头下冲洗，严禁污染下水道。